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可见分光光度计测定食品中铬
发表于:2016年11月16日 来源:本站原创 点击:
  原理:采用二苯碳酰二肼(二苯氨基脲)比色法。二苯碳酰二肼(二苯氨基脲)与铬生成红色络合物,于 540 nm 处测定吸光度,吸光度值与铬的浓度符合朗勃-比尔定律。
 
  仪器和设备
 
  721 型可见分光光度计或能达到同等要求的可见分光光度计;高温炉。
 
  试剂和材料
 
  高锰酸钾溶液(5 g/L):称取 0.5 g 高锰酸钾,溶解并稀释至 100 mL,贮存于棕色瓶中。
 
  尿素溶液(100 g/L):称取 10 g 尿素,溶解并稀释至 100 mL,贮存于棕色瓶中,置于暗冷处。
 
  亚硝酸钠溶液(100 g/L):称取 10 g 亚硝酸钠,溶解并稀释至 100 mL,贮存于棕色瓶中,置于暗处,或现用现配。
 
  二苯碳酰二肼丙酮溶液:称取 0.125g 二苯碳酰二肼,溶于由 25 mL 丙酮和 25 mL 水配成的混合液中,现用现配,放置于暗处。
 
  焦磷酸钠溶液(5 g/L):称取 0.5 g 焦磷酸钠,溶解并稀释至 100 mL,贮存于试剂瓶中。
 
  铬标准储备液(0.02 mg/mL):准确称取 0.0566 g 重铬酸钾(优级纯,在玛瑙研钵中研细,并在 105 ℃~110 ℃干燥 3 h~4 h 后,置于干燥器中冷却),置于小烧杯中,用水溶解,移入 100 mL 容量瓶中,加水至刻度。
 
  硫酸溶液(1 mol/L):量取 28 mL 硫酸,缓缓加入盛有一定量纯水的 500 mL 容量瓶中,再加水至刻度。
 
  分析步骤
 
  绘制标准工作曲线:移取铬标准溶液 0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、1.00 mL、1.60mL、2.00 mL、2.60 mL,相当于含铬 0.0 μg、4.0 μg、8.0 μg、12.0 μg、20.0 μg、32.0 μg、40.0 μg、52.0μg,分别置于烧杯中。各加入硫酸溶液 10 mL 及水 10 mL,加热煮沸,滴加高锰酸钾溶液至溶液不褪色,冷却,定量转移至 50 mL 容量瓶中,加入尿素溶液 10 mL,剧烈振摇下滴加亚硝酸钠溶液至溶液褪色。加入焦磷酸钠溶液 2.0 mL、二苯碳酰二肼 0.5 mL。用水定容,摇匀,放置 30 min 后,于波长40 nm 处测定吸光度值,绘制出 c -D 标准工作曲线。
 
  样品预处理及测定:准确称取明胶 1.000 g 于坩埚中,缓慢升温,使之炭化,放冷。加浓硝酸数滴,慢慢加热,气体停止逸出时,移入高温炉中,于 600 ℃下灼烧至所有黑色颗粒消失(2 h),取出待冷却后加硫酸溶液 10 mL 和水 20 mL 使残渣溶解,在水浴上加热 5 min。滴加高锰酸钾溶液煮沸,溶液紫红色消失时再滴加高锰酸钾溶液煮沸,如此反复直至紫红色不褪为止,放冷、加尿素溶液10 mL,剧烈振摇下滴加亚硝酸钠溶液,直至过量的高锰酸钾完全消除,溶液呈无色。如二氧化锰明显存在则过滤。定量转移至 50 mL 容量瓶中,加入焦磷酸钠溶液 2 mL、二苯碳酰二肼溶液 0.5 mL,用水定容,摇匀。放置 30 min。
 
  取 A.9.4.2 中所得样品溶液,在 540 nm 波长处测定出吸光度值,即可由 c -D 标准工作曲线计算得到试样的铬含量。
 
  结果计算
 
  由 c -D 标准工作曲线计算得到铬含量,单位为毫克每千克(mg/kg)。结果表示到小数点后一位。取平行测定结果的算术平均值为测定结果。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过 0.2 mg/kg。
 
 
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可见分光光度计测定食品中铬
 
 
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