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离子色谱仪测定食品营养强化剂中低聚半乳糖含量
发表于:2016年12月08日 来源:湖南创特 点击:
  方法提要:用磷酸盐缓冲液提取试样中游离的低聚半乳糖和乳糖,采用半乳糖苷酶将提取液中低聚半乳糖的乳糖酶解,将提取的初始溶液和酶处理过的溶液分别用于高效离子色谱仪测定。第一步测定初始溶液中游离的半乳糖和乳糖,第二步测定从低聚半乳糖和乳糖中释放出的半乳糖总量。利用乳糖和半乳糖的含量计算试样中低聚半乳糖的含量。
 
  实验仪器
 
  1、高效离子色谱仪(南京科捷分析仪器有限公司)采用与WATERS液相相同的并联泵输液方式,工作耐压值高,脉动小、稳定可靠。进样器与整机分体式模式,具有良好的抗干扰性和可拓展性。接头、流路均使用进口Peek材料,耐强酸强碱。连续自动再生电化学抑制器,抑制容量高。高分辨率触摸屏配有WinCE操作系统,以及全中/英文显示的数据处理系统。
 
  2、超声波清洗机
 
  酶解试样前处理:1.吸取制备的试样液10mL,移入100mL容量瓶中,标记为A1,吸取1mLβ-半乳糖苷酶溶液,放入A1中,用铝箔纸密闭摇匀;同时做酶试剂空白A0。
 
  2.将含有活性酶A1和A0的两个100mL容量瓶在(60±2)℃水浴中持续温和振摇60min(从混合物温度达到60℃开始计算时间,振摇过程中避免形成水沫或空气泡沫),然后将A0和A1两个处理溶液,用冰浴冷却至室温,向A1,A0两个100mL容量瓶中各加入20%乙腈溶液5mL,用水定容,混匀。分别取适量上述处理后溶液至离心管中,10000r/min离心10min,上层水相用0.2μm滤膜过滤。
 
  色谱参考条件
 

色谱柱

PA20阴离子交换色谱柱(150mm×3mm,颗粒3.5μm,

保护柱(30mm×3mm)或等效色谱柱

柱温

30

流动相流速

0.4mL/min

进样量

20μL

检测器

脉冲安培检测器

 

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