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高效液相色谱分离类型的选择
发表于:2016年10月04日 来源:本站原创 点击:
  应用高效液相色谱法对试样进行分离、分析,其方法的选择,应考虑各种因素,其中不包括试样的性质(相对分子质量、化学结构、极性、溶解度参数等化学性质和物理性质)、液相色谱分离类型的特点及应用范围、实验室条件(仪器、色谱柱等)等。
 
  相对分子质量较低,挥发性较高的试样,适于用气相色谱法。标准的液相色谱类型(液-固、液-液和键合相、离子交换、离子对色谱、离子色谱等)适用于分离相对分子质量为200~2000的试样,而大于2000的则宜用空间排阻色谱法,此时可判定试样中具有高相对分子质量的聚合物、蛋白质等化合物,以及测出相对分子质量的分布情况。因此在选择时应了解、熟悉各种液相色谱类型的特点。
 
  了解试样在多种溶剂中的溶解情况,有助于分离类型的选用。例如对能溶解于水的试样可可采用反相色谱法。若溶于酸性或碱性水溶液,则表示试样为离子型化合物,以采用离子交换色谱法、离子对色谱法或离子色谱法为佳。
 
  对非水溶性试样(很多有机物属此类),弄清它们在烃类(戊烷、己烷、异辛烷等)、芳烃(苯、甲苯等)、二氯甲烷或氯仿、甲醇中的溶解度是很有用的。溶于烃类(如苯或异辛烷),可选用液-固吸附色谱;如溶于二氯甲烷或氯仿,则多用正相色谱和吸附色谱;如溶于甲醇等,则可用反相色谱。一般用吸附分离异构体。用正相或反相色谱来分离同系物。空间排阻色谱可适用于溶于水和非水溶性、分子大小有差别的试样。
 

试样

相对分子质量>2000

溶于水

排阻色谱,水为流动相

不溶于水

排阻色谱,非水流动相

相对分子质量<2000

不溶于水

同系物:正相或反相色谱

异构体多官能团:吸附色谱

分子大小差异:排阻色谱

溶于水,不解离

反相色谱

排阻色谱(小孔),水为流动相

溶于水,可解离

碱:阳离子交换色谱

酸:阴离子交换色谱

溶于水,离子与非离子

反相离子对色谱

 

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高效液相色谱分离类型的选择
 
 
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