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高效液相色谱仪测定饲料中泰乐菌素
发表于:2016年12月19日 来源:湖南创特 点击:

原理:试样中的泰乐菌素经二氯甲烷提取后,过滤,滤液经HLB小柱净化、浓缩,注入高效液相色谱仪进行分离,用紫外检测器检测,外标法定量。

 

仪器设备

高效液相色谱仪,配紫外检测器(南京科捷分析仪器有限公司)由P600B高压恒流泵、SPD600B紫外可见可变波长检测器与SCL600B系统控制器构成分析系统。输液泵采用柱塞浮动式安装方式,增强仪器性能的稳定性和使用的持久性。仪器操作简便,多种配置,针对各行业的应用分析,便于客户的选择。

振荡器

天平

固相萃取装置

超纯水处理器

氮吹仪

真空泵

高速离心机

旋转蒸发仪

真空抽滤装备

微孔滤膜

 

样品处理

1、提取:准确称取2~3g饲料样品(精确至0.01g)置于100mL具塞三角瓶中,加入25mL二氯甲烷于振荡器上振荡提取20min,用快速滤纸过滤,收集全部滤液于梨形瓶中,在45℃下于旋转蒸发器上蒸干溶剂,加入0.5mL甲醇溶解残渣,再加入pH=5.5的乙酸钠缓冲溶液4.5mL,轻轻摇匀,将此溶液转入20mL离心管中,用少量乙酸钠缓冲溶液冲洗梨形瓶,洗液合并入离心管中。在离心管中加入5mL正己烷,轻轻摇动离心管,防止乳化,于4000r/min离心5min,使分层,弃去正己烷层,下层水相层备用。

 

2、净化:HLB小柱固定在固相萃取装置上,依次用5mL甲醇和5mL超纯水活化柱子,将全部水相层加入小柱,让溶液自然流下,分别用5mL水和5mL淋洗液淋洗,待淋洗液全部流出,抽干HLB小柱中的液体,用5mL甲醇洗脱,收集洗脱液于试管中,在氮气流下吹干,用1mL乙腈溶解残渣,过0.45μm滤膜,上机测定。

 

色谱条件

流动相

乙腈:甲醇:0.005mol/L磷酸二氢铵=503515

流速

0.6mL/min

柱温

25

检测器

紫外检测器

检测波长

290nm

色谱柱

Symmetry shield RP182),柱长250mm,内径3.9mm,或性能类似的色谱柱

进样体积

20μL

 高效液相色谱仪测定饲料中泰乐菌素

泰乐菌素 标准溶液的液相色谱图(点击查看大图)

 
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高效液相色谱仪测定饲料中泰乐菌素
 
 
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